Anti-GE-porcine pseudorabies virus antistof Elisa Kit

Specifikation

PRV-GE AB ELISA

Påtænkt brug: Den porcine pseudorabies virus ge blokering

Antistof ELISA -detektionssæt er til bestemmelse af GE -antistof hos svinens serum af porcine pseudorabies -virus in vitro. Testen bruges til at skelne inficeret vildt

Virus og vaccineret fra immunisering med GE -gen -deletionsvaccine.

Prøve: serum

Materialer kræves, men ikke leveret:

Oprenset vand

Pipettor

96- Nå mikropladelæser (450nm)

Timer

Centrifuge (4000 o / min)

Vaskemaskine

Ovn (37 grader)

 

Testprocedurer og fortolkning

Trin 1 Testprocedure

1.1 Forberedelse

Working -koncentration wAsing væske:Før brug skal WASH -opløsningen gendannes til stuetemperatur (20-25 grad) og rystes jævnt for at gøre den ensartet. Fortynd derefter 20 gange den koncentrerede vaskeopløsning med oprenset vand (for eksempel tilsættes 5 ml koncentreret vaskeløsning til 95 ml renset vand), bland godt, og den fortyndede vaskevæske kan opbevares ved 2-8 grad i 7 dage.

1.2 Prøveforberedelse

① Hele dyreblod blev taget, centrifugeret ved 4000 omdrejninger pr. Minut i 10 minutter, og supernatant blev opsamlet. Serum kan også koaguleres naturligt uden hæmolyse.

② Fortynd serumprøven 1: 1 (tilsættes 70ul -serumprøve til 70ul -prøvefortyndingsmiddel) og bland grundigt.

Bemærk: Negative og positive kontroller behøver ikke fortyndes.

1.3 Testprocedure

Tag enzymetiketmikropladen (i henhold til antallet af prøver, kan adskilles og bruges flere gange), tilsættes 100ul af det fortyndede serum til enzymetiketmikropladen, indstil to brønde hver til negative og positive prøver og tilføj 100ul hver for negativ og positive kontroller til reaktionen godt. Ryst forsigtigt prøven i brønden ved hjælp af tætningspladefilmen til at dække pladen og inkuberes ved 37 grader i 60 minutter.

②Open forseglingspladefilmen, ryst opløsningen i pladen godt, tilsæt 300 µl arbejdskoncentrationsvæskning til hver brønd, og kasser derefter væsken i brønden. Gentag ovenstående trin 5 gange, og klap til sidst tørt på et rent absorberende papir.

③add 100 µl enzymkonjugat til hver brønd, dækker pladen og inkuberer ved 37 grader i 30 minutter.

④Open forseglingspladefilmen, ryst op opløsningen i pladen godt, tilsæt 300 µl arbejdskoncentrationsvæskning til hver brønd, og kasser derefter væsken i brønden. Gentag ovenstående trin 5 gange, og klap til sidst tørt på et rent absorberende papir.

⑤add 100 µl substratopløsning til hver brønd, dæk pladen og inkuber i 15 minutter ved 37 grader væk fra lys.

⑥add 50 µl stopopløsning til hver brønd, og bestem resultatet inden for 5 minutter.

Trin 2 Resultatfortolkning

OD450 -værdien af ​​hver brønd blev læst på 96- godt mikropladelæser.

2.1 Validering

The average OD450nm value of negative control was ≥ 0.5 and the blocking rate of positive control was >50%var de eksperimentelle resultater gyldige. Ellers skal testen gentages.

2.2 Beregningsmetode

For hver prøve skal du beregne PI (BlockingR AT) som følger ved hjælp af de korrigerede prøve- og kontrolværdier:

2.3 Resultatfortolkning

Når PI <40%, bedømmes det som negativt.

Når PI> 50%, bedømmes det som positivt.

Når 40% mindre end eller lig med PI mindre end eller lig med 50%, bedømmes det som mistænkeligt og foreslår at gentage prøveudtagning og teste en uge senere.

Populære tags: Anti-Ge-porcine pseudorabies virus antistof ELISA-kit, Kina Anti-GE-porcine Pseudorabies Virus Antistof ELISA KIT Leverandører, producenter, fabrik